Chiba/Week1

8/17(Thu)

• pUC-FliCのPCR

8/18(Fri)

8/19(Sat)

8/20(Sun)

8/16(Wed)

AHL Expression Test

BiobrickのAHLsender&recieverを使ってシグナル伝達してるかテスト

• 使用したパーツ
  • Reciever: BBa_T9002 (TetP-LuxR-T-LuxP-GFP-T)
  • Sender1:BBa_S03608 (LacP-LuxI)
  • Sender2:BBa_S03623 (TetP-LuxI)
  • Strain:XL10
• 条件
  • 液体培地(LB-Amp)
  • 固体培地(LB-Amp/1.5% Agar)
  • SwarmPlate(Triptone-Amp/0.25% Agar)
• 実験結果
  • 固体培地：GFP発現した．AHLで伝達している．（他の培地は？）
  • Sender2・BBa_S03623 (TetP-LuxI) の方がAHL放出量が多い
    • XL10内にLacRは有るがTetR無い
    • よってLacPはある程度抑制されているがTetPは抑制されていない
    • すなわちプロモーターの差でした
• Notes
  • XL10はAHLをあまりつくらないことを後から知った．田代さん達の実験データよりBW25113とかHB101が良い

8/17(Thu)

8/16の結果を見た．

8/18(Fri)

AHL Expression Test その２

• 以下のように条件を変えて8/16と同様にAHL伝達テスト．
• AHL生産量が少ないXL10でやったので後からはあまり使わないであろうデータ

1. プレートを薄くした
2. Senderを濃くした（遠心）
   • Senderの濃度をあげてもある程度（どれくらい？）でAHLの濃度は収束する
3. Recieverの濃度ふった
   • Recieverの濃度が高すぎるとAHL生成量（AHL濃度？）が少なくなる

8/19(Sat)

8/20(Sun)