Chiba/Goal

From 2007.igem.org

(Difference between revisions)
(→有限確認test)
(→有限確認test)
Line 28: Line 28:
  1.senderとreceiverを試験管でそれぞれ培養する。
  1.senderとreceiverを試験管でそれぞれ培養する。
  2.receiverをプレートに均一にまき、senderを真ん中に少量スポットし一晩培養する。
  2.receiverをプレートに均一にまき、senderを真ん中に少量スポットし一晩培養する。
-
  3.senderの近く（GFPを発現している)、中間、遠く（GFPを発現していない）から数箇所ずつ菌をとってそれぞれ希釈液を作　　る。
+
  3.senderの近く（GFPを発現している)、中間、遠く（GFPを発現していない）から数箇所ずつ菌をとってそれぞれ希釈液を作る。
  4.希釈した菌にCo2+を加えてプレートにまく。
  4.希釈した菌にCo2+を加えてプレートにまく。
 +
5.FliCを発現していなかったreceiverは、ばらばらのコロニーを作り、FliCを発現していたreceiverは塊になったコロ　　　ニーを作る。
 +
　
　
　1.
　1.
Line 35: Line 37:
　3.senderの近く（GFPを発現している)、中間、遠く（GFPを発現していない）から数箇所ずつ菌をとってそれぞれ希釈液を作　　る。
　3.senderの近く（GFPを発現している)、中間、遠く（GFPを発現していない）から数箇所ずつ菌をとってそれぞれ希釈液を作　　る。
　4.
　4.
-
　5.FliCを発現していなかったreceiverは、ばらばらのコロニーを作り、FliCを発現していたreceiverは塊になったコロ　　　ニーを作る。
+
　5.
===りんご飴アッセイ===
===りんご飴アッセイ===

Revision as of 13:16, 23 October 2007

Chiba logo.png

Introduction | Project Design | Engeneering Flagella | Quorum Sensing | Our Goal || Team Members | メンバ連絡簿


Marimo をつくる

  • 鞭毛間吸着テスト
  • 有限確認テスト
  • りんご飴アッセイ

鞭毛間吸着test

senderとreceiver同士がHis-Tagで吸着しているかを確認するためのテストである。 このテストでは、His-tag同士の吸着を阻害するimidazolを用いて行う。 

1.Senderとreceiverをそれぞれ培養し、receiverの培養液の中に、senderを１滴加える。
2.その中に金属イオンを加えると、senderとreceiverが鞭毛同士で吸着し始める。
3.ある程度吸着したら、imidazolを加えたものとそうでないものをプレートにまく。
4.imidazolを加えたものはばらばらのコロニーができ、imidazolなしのものは、senderとreceiverが
  くっついているので、くっついたコロニーができる。

有限確認test

マリモを作る前の段階として、マリモの成長が有限の大きさで止まるか２次元で確認するためのテスト。 

1.senderとreceiverを試験管でそれぞれ培養する。
2.receiverをプレートに均一にまき、senderを真ん中に少量スポットし一晩培養する。
3.senderの近く（GFPを発現している)、中間、遠く（GFPを発現していない）から数箇所ずつ菌をとってそれぞれ希釈液を作る。
4.希釈した菌にCo2+を加えてプレートにまく。
5.FliCを発現していなかったreceiverは、ばらばらのコロニーを作り、FliCを発現していたreceiverは塊になったコロ　　　ニーを作る。

　 　1. 　2. 　3.senderの近く（GFPを発現している)、中間、遠く（GFPを発現していない）から数箇所ずつ菌をとってそれぞれ希釈液を作　　る。 　4. 　5.

りんご飴アッセイ

Retrieved from "http://2007.igem.org/wiki/index.php/Chiba/Goal"