Chiba/Making Marimo
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*flic-his generator & flic-his biobrickは作りましたっけ？ | *flic-his generator & flic-his biobrickは作りましたっけ？ | ||
*ligationがうまくいかず、そこで止まってしまいました。 | *ligationがうまくいかず、そこで止まってしまいました。 | ||
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1.2.3をくっつけてマリモをつくる！の図． | 1.2.3をくっつけてマリモをつくる！の図． | ||
Revision as of 22:57, 26 October 2007
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Introduction | Project Design ( 1.Sticky Hands | 2.Communication | 3.Size Control ) | Making Marimos | Our Goal || Team Members | メンバ連絡簿 |
（このページの存在意義について話し合いたいです古）
- クオラムとfliC-hisを合体させた実験てやりました？
- やってないです・・・・
- flic-his generator & flic-his biobrickは作りましたっけ？
- ligationがうまくいかず、そこで止まってしまいました。
- ってことはPCRまではいっているということなら、このページのExperimentとして入れていいんじゃない？by とよたろ
Making Marimos
1.2.3をくっつけてマリモをつくる！の図．
Parts Construction
FliC内にはBiobrickで使用する制限酵素（＿＿）が入っているため，シグナル側のプラスミドとは分けた．
FliC-His generator
- His-tagを入れたFliCをpLuxの下に置き、LuxRが発現されている条件のもとならば、Quorum SensingでFliCを発現させることができるようにする。
- Quorum Sensingのための遺伝子回路がcolEI oriのvectorに乗っているために、p15Aのベクターを使いdouble transformation することでQuorum Sensingと合わせることができるようになる。
FliC-his biobrick
必要なこと
- puc19 vectorの乗っているのでbiobrickのベクターに乗せる。
- 制限酵素サイト(EcoRI,SpeI,PstI)をつぶす。
- FliC His-TagにはEcoRI,SpeI,PstIが含まれているために、そのままではvectorに入れられない。
#片側をblunt end もう一方をApaIの制限酵素サイトをつけ、PCRする。 #vector側も同様にPCRしLigationさせる。
Experiments
Stick-or-not Assay
Sample
- Plux-fliC
- Pbad-fliC
- ここのデータは誰が担当かな？どこまでデータが出せる？byとよたろ
Results
- Swarm test
- Stick test
