Chiba/Flagella/Making FliC-his
From 2007.igem.org
- pUC19 vectorにFliCをコードする遺伝子を挿入→pUC19-FliC
- FliCの可変領域のうち、フィラメントの外側部分から5か所を選び、プライマーを設計(207,228,240,252,267)し、エキサイトPCR→pUC19-FliC vector
- EcoRⅠSite,2×Ser,6×His,2×Ser,NcoⅠ siteをコードするオリゴをデザイン。
(six histidine loop peptide ("His-loop")(containing imidazole side chain), -Ser-Ser-His-His-His-His-His-His-Ser-Ser,encoded by the oligo 5'-TCT-TCT-CAT-CAT-CAT-CAT-CAT-CAT-TCC-TCC-3' and anti oligo 5'-GGA-GGA-ATG-ATG-ATG-ATG-ATG-ATG-AGA-AGA-3')
- pUC19-FliC vector と6×Hisオリゴをライゲーション.