NYMU Taipei/Key experiments/A Ken's progress
From 2007.igem.org
2007/08/20
- 細胞測試組 阿Ken 星期一晚上自家lab meeting and 孟儒星期一晚上要補習 so....sorry 啦
- anyway 我們已經在動作了:
- 我們計畫找到ㄧ個range 從 1000mg/L (5.55mM) 到 4500mg/L (25mM) 的試劑~
- 附註: 一般人的的低血糖是3mM, 糖尿病人的高血糖是20mM; 大腸桿菌的glucose實驗濃度為4g/L (20mM)
- 因為cell culture的 medium glucose 濃度大概就是這個range
在怎麼樣也得控制住細胞生長的medium狀況 要不然很難維持細胞活性 @@|||
目前的設計是使用glucose 濃度1000mg/L的medium 再另外添加等比的or 等差的glucose進去
最高加到4500mg/L
then 加入含insulin的filtered 菌液看condition medium 中glucose的濃度變化
(要請對insluin 比較熟悉的夥伴建議ㄧ下此實驗要取的time course 跟加入insulin的濃度 )
若有變化的話再加測一些cell based 的assay, 看glucose 的代謝物 or 代謝enzyme的活性 - glucose kit的部份很殘忍的全部丟給孟儒去screen之前各方提供來的資訊 由他去選擇幾組可能的candidate 最後在小組討論選出最終的使用試劑
- 而阿Ken 要負責找出最適本實驗用的cell line 並完成與食科所的連絡
- 有結果的話 會再po到網頁上來 為各位做real time的progress report~
- 以上~
我從之前的email list 中找到了兩家的glucose kit,本來想找sigma的,不過sigma的產品資訊中並沒有寫到 linear detection range,所以我就沒有選了<a href="http://www.rpbiotech.com/Biochem_diag_kits/Glucose_Diagnostic_Kit.htm">http://www.rpbiotech.com/Biochem_diag_kits/Glucose_Diagnostic_Kit.htm</a>上面這家(RecPro Biotech Glucose Diagnostic kit)的可以達到4000/L但他沒寫從哪裡開始@@
<a href="http://www.bioassaysys.com/DIGL.pdf">http://www.bioassaysys.com/DIGL.pdf</a>
上面這家(QuantiChrom Glucose Assay kit)可以達到7mg/L (0.038mM) ~3000mg/L
2007/08/23
目前sigma的有三個選擇,但我prefer G3293和GAHK20,因為GAGO20的range跟我們的比較不同,可能還要另外處理
G3293 20ML 1228元
50ML 2048元
GAGO20 1750元
GAHK20 1830元
這是友和公司的報價,我有跟他們說我們在討論討論再給他回覆
G3293和GAHK的差別是:
G3293只有glucose assay reagent
GAHK含有glucose assay reagent 20ml和glucose standard
我想說今天中午有討論到20個Assay可能不夠用,不然就是要dilute
所以可以買G3293的50ML的或是買20ML的來稀釋,
Kit的話我不知道glucose standard我們是不是可以自己準備?
如果可以的話就可以選擇G3293了,這樣看起來比較省錢