Paris/July 20

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PCRs

Je n’ai pas pu lancer la PCR car :

Les oligos O10 et O11 ne sont pas dilués à 10μM (ni les autres oligos après O9 d’ailleurs ??!!). Les fiches des oligos ne sont pas dans le classeur, je ne peux donc pas savoir à quelle concentration est le stock ! NB : Tous les oligos en stock sont à 100µM. Et ils sont ensuite dilués à 10µM dans l'autre boïte


PCR : Lox71-KmR-Lox66
PCR Settings Buffer (5x) 5x 10µL Expected size
Annealing (°C) MgCl2 10µM 10µM 0µL
55°(3x)-63°(35x)C dNTP 10µM 10µM 1µL Success
Time Elongation Oligo F 10µM 10 Lox71-KmR-F 2.5µL
2m00' Oligo R 10µM 11 Lox66-KmR-R 2.5µL Image (click to enlarge)
Number cycles Water 30µL [[Image:|30px]]
38 Polymerase Phusion 0.5µL Band (0=ladder)
DNA MP3_pSB1AK3-BBa_B0015 2µL dil.100

Glycerol stock

  • BBa_pJ23107 clone 3&4 (S14)
  • BBa_I0500 clone 1&2 (S13)

Minipreps on Biobricks

  • BBa_pJ23107 clone 3&4
  • BBa_I0500 clone 1&2