Chiba/Project Design

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Project Design

Concept

ものがたり
Story.PNG22s.jpg
ばらばらになっている大腸菌を一ヶ所に集めて吸着させて、まりものような球体の大腸菌の集合体を作ることを目指した。(We aimed to make bacteria cluster of sphere such MARIMO by scattered bacterias aggregating and sticking each other.)

How Our System Works

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  1. 核になる大腸菌(A)は常に大腸菌同士が吸着する何か(X)を発現しているのでA同士が吸着します。Aは常に信号(Y)を送ります(Because bacterias of core(A) constantly manifest what sticks bacterias(X),A stick each other. A constantly send a signal(Y).
  2. Aが送ったYが届く範囲にいるYを受け取る大腸菌(B)はGFPを発現し、Xを発現します。
  3. BはAの周りに吸着します。
  4. しかしこのままでは大腸菌の集合体が際限なく大きくなってしまいます。そこでBはYを分解する何か(Z)を発現してYを分解します。Yの広がりが抑えられ、Yを受け取るBの数が制限されるので大きさが有限に定まります。

What our system requires

1.Bacteria linker

Make a His-tagged Flagella. We aimed to stick bacteria by displaying histidines (which bonds with metal ions) on the flagellar fillament.

鞭毛にヒスタグをディスプレイし,金属イオンを介して,バクテリアを接着することを目指した.
Fig1. His-tagged flagella as a bactria linker. 鞭毛は便宜上1本しか描いてないが実際は1~10本/細胞.

2.Size Controller

Make an AHL concentration gradient for quorum sensing.

Fig2. AHL concentration gradient.

Genetic Circuit

Chiba marimosystem.png

Sender

Send gene circuit.jpg
常にFliC-Hisを発現する。常にAHLを合成する。

Receiver

  • BBa_T9002(Normal Receiver)

BBa T9002.jpg
AHL存在下でGFPを発現する。AHL存在下でFliC-Hisを発現する。

  • Sensitive Receiver

Mutant rec.jpg

  • Inverter aiiA Receiver

Rec inv aiia.jpg