Chiba/Week1

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< Chiba(Difference between revisions)
(→AHL Expression Test)
 
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== Week1(8/16~8/23) ==
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== 8/17(Thu) ==
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'''Monday,August,17,2007'''
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*pUC-FliCのPCR
*pUC-FliCのPCR
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== 8/19(Sat) ==
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<!-- AHL Team -->
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==8/16(Wed)==
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===AHL Expression Test===
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'''BiobrickのAHLsender&recieverを使ってシグナル伝達してるかテスト'''
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*使用したパーツ
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**Reciever: [http://partsregistry.org/Part:BBa_T9002 BBa_T9002] (TetP-LuxR-T-LuxP-GFP-T)
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**Sender1:[http://partsregistry.org/Part:BBa_S03608 BBa_S03608] (LacP-LuxI)
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**Sender2:[http://partsregistry.org/Part:BBa_S03623 BBa_S03623] (TetP-LuxI)
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**Strain:XL10
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*条件
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**液体培地(LB-Amp)
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**固体培地(LB-Amp/1.5% Agar)
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**SwarmPlate(Triptone-Amp/0.25% Agar)
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*'''実験結果'''
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**'''固体培地：GFP発現した．AHLで伝達している．'''（他の培地は？）
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**Sender2・[http://partsregistry.org/Part:BBa_S03623 BBa_S03623] (TetP-LuxI) の方がAHL放出量が多い
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***XL10内にLacRは有るがTetR無い
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***よってLacPはある程度抑制されているがTetPは抑制されていない
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***すなわちプロモーターの差でした
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*Notes
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**XL10はAHLをあまりつくらないことを後から知った．田代さん達の実験データよりBW25113とかHB101が良い
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== 8/17(Thu) ==
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8/16の結果を見た．
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== 8/18(Fri) ==
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===AHL Expression Test その２===
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*以下のように条件を変えて8/16と同様にAHL伝達テスト．
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*AHL生産量が少ないXL10でやったので'''後からはあまり使わないであろうデータ'''
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#プレートを薄くした
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#Senderを濃くした（遠心）
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#*Senderの濃度をあげてもある程度（どれくらい？）でAHLの濃度は収束する
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#Recieverの濃度ふった
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#*Recieverの濃度が高すぎるとAHL生成量（AHL濃度？）が少なくなる
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== 8/19(Sat) ==
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== 8/20(Sun) ==
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Latest revision as of 09:47, 16 September 2007

FliC Group AHL Group

8/17(Thu)

  • pUC-FliCのPCR
F/R FliC-207 FliC-228 FliC-240 FliC-252 FliC-267
FliC-207 ①
FliC-228 ② ③
FliC-240 ④ ⑤ ⑥
FliC-252 ⑦ ⑧ ⑨ ⑩
FliC-267 ⑪ ⑫ ⑬ ⑭ ⑮

8/18(Fri)

8/19(Sat)

8/20(Sun)

8/16(Wed)

AHL Expression Test

BiobrickのAHLsender&recieverを使ってシグナル伝達してるかテスト

  • 使用したパーツ
    • Reciever: [http://partsregistry.org/Part:BBa_T9002 BBa_T9002] (TetP-LuxR-T-LuxP-GFP-T)
    • Sender1:[http://partsregistry.org/Part:BBa_S03608 BBa_S03608] (LacP-LuxI)
    • Sender2:[http://partsregistry.org/Part:BBa_S03623 BBa_S03623] (TetP-LuxI)
    • Strain:XL10
  • 条件
    • 液体培地(LB-Amp)
    • 固体培地(LB-Amp/1.5% Agar)
    • SwarmPlate(Triptone-Amp/0.25% Agar)
  • 実験結果
    • 固体培地：GFP発現した．AHLで伝達している．（他の培地は？）
    • Sender2・[http://partsregistry.org/Part:BBa_S03623 BBa_S03623] (TetP-LuxI) の方がAHL放出量が多い
      • XL10内にLacRは有るがTetR無い
      • よってLacPはある程度抑制されているがTetPは抑制されていない
      • すなわちプロモーターの差でした
  • Notes
    • XL10はAHLをあまりつくらないことを後から知った．田代さん達の実験データよりBW25113とかHB101が良い

8/17(Thu)

8/16の結果を見た．

8/18(Fri)

AHL Expression Test その２

  • 以下のように条件を変えて8/16と同様にAHL伝達テスト．
  • AHL生産量が少ないXL10でやったので後からはあまり使わないであろうデータ
  1. プレートを薄くした
  2. Senderを濃くした（遠心）
    • Senderの濃度をあげてもある程度（どれくらい？）でAHLの濃度は収束する
  3. Recieverの濃度ふった
    • Recieverの濃度が高すぎるとAHL生成量（AHL濃度？）が少なくなる

8/19(Sat)

8/20(Sun)

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