Chiba/Week1

8/17(Thu)

• pUC-FliCのPCR

8/18(Fri)

8/19(Sat)

8/20(Sun)

8/16(Wed)

AHL Expression Test

BiobrickのAHLsender&recieverを使ってシグナル伝達してるかテスト．

• 使用したパーツ
  • Reciever: [http://partsregistry.org/Part:BBa_T9002 BBa_T9002] (TetP-LuxR-T-LuxP-GFP-T)
  • Sender1:[http://partsregistry.org/Part:BBa_S03608 BBa_S03608] (LacP-LuxI)
  • Sender2:[http://partsregistry.org/Part:BBa_S03623 BBa_S03623] (TetP-LuxI)
• 条件
  • Strain:XL10
  • 液体培地(LB-Amp)
  • 固体培地(LB-Amp/1.5% Agar)
  • SwarmPlate(Triptone-Amp/0.25% Agar)
• 実験結果
  • （福富くんに聞く)
  • Sender2・[http://partsregistry.org/Part:BBa_S03623 BBa_S03623] (TetP-LuxI) の方がAHL放出量が多い
    • 使ったE.coli（Strain:XL10) 内にLacR有がTetR無い
    • よってLacPはある程度抑制されているがTetPは抑制されていない
• Notes
  • XL10はAHLをあまりつくらないことを後から知った．田代さん達の実験データよりBW25113とかHB101が良い

8/17(Thu)

AHL Expression Test その２

以下のように条件を変えて8/16と同様にAHL伝達テスト．

1. プレートを薄くした
2. Senderを濃くした（遠心）
   • Senderの濃度をあげてもある程度（どれくらい？）でAHLの濃度は収束する
3. Recieverの濃度ふった
   • Recieverの濃度が高すぎるとAHL生成量（AHL濃度？）が少なくなる

• 次やること
  • Met(AHLのpre-precursur）加えたプレートでAHL生成量増えるかテスト
  • Agarの濃度ふる
  • Recieverの濃度ふる

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